整个提取过程从下午一点开始。
苏寒先用玛瑙研钵把水泥碎屑研碎。研得很细,粉末状,力道控制得刚好——太大信号不够,太过头核酸也碎了。
沈逸飞端了一把椅子坐在旁边,胸前的运动相机还在录。
“师兄,你这个研磨力度是怎么把握的?有量化标准吗?”
“没有。手感。”
沈逸飞在笔记本上写:“手感(暂无法量化)。”
苏寒把研碎的粉末转移到一个15毫升的离心管里,加入预先配好的裂解缓冲液——含SDS去垢剂、蛋白酶K、螯合剂EDTA。
“水泥基质的主要成分是硅酸钙,碱性环境。DNA在碱性条件下会降解,所以缓冲液的pH要压到偏酸性,6.5左右。蛋白酶K用来消化变性蛋白——包括那些被高温烧变性的血红蛋白。”
沈逸飞飞快地记。
“EDTA螯合二价金属离子,抑制核酸酶活性,防止提取过程中残余的DNA被酶切掉。”
苏寒说完这些,把离心管放进恒温摇床,设定56度,180转。
“震荡两小时。让缓冲液充分渗透水泥颗粒,把里面的生物分子洗脱出来。”
“两小时?”沈逸飞看了看表。“那我——”
“你可以先去吃饭。”
“我不饿。”
苏寒看了他一眼。“我饿。帮我带个饭。”
沈逸飞这才跑出去了。
下午三点,摇床停了。苏寒取出离心管,液面浑浊,灰褐色,看上去就是一管脏水。
他先做第一轮离心。3000转,十分钟。管底沉下去一层灰白色的沉淀——水泥??ite颗粒。上层液体变成了浅棕色。
苏寒用移液器小心地把上清液吸出来,转移到一个新的离心管里。弃掉沉淀。
“第一轮离心去大颗粒。”他头也没抬地说。
沈逸飞在旁边应了一声,相机对着操作台。
第二轮离心。12000转,二十分钟。高速离心之后,管底出现了一层极薄的、几乎看不见的膜状沉淀。
苏寒把管子举到灯下。
那层膜是淡白色的,薄得像是贴在管壁上的一片影子。
“这就是目标物。变性蛋白和DNA的混合物。如果里面有DNA的话。”
沈逸飞凑过来看,鼻尖差点怼到管壁上。
“看到了看到了。”他说,语气里带着一股不正常的亢奋。
苏寒把上清液倒掉,往管底的沉淀里加入纯化试剂,轻柔地吹打混匀。然后进入
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